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cDNA文库构建

所在分类:供求商机 > 产品供应时间:2025-8-22 17:26:44

cDNA文库是指某生物某发育时期所转录的全部mRNA经反转录形成的cDNA片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。
标准cDNA文库构建的基本原理是用Oligo(dT)作逆转录引物,或者用随机引物,给所合成的cDNA加上适当的连接接头,连接到适当的载体中获得文库。

文库构建流程:

1.样品QC

2.从总RNA中分离mRNA(原始文库将采用至少2µgmRNA进行构建)

3.以带有NotI酶切位点的oligo(dT)LinkerPrimer为反转录引物,再在双链cDNA的5’端加SalIIadaptor

4.NotI酶切、过柱去除小片段

5.将合成的双链cDNA与载体进行连接,连接产物转化DH10B感受态细胞

6.cDNA文库的QC:检测库容量(重组子克隆数目);随机挑取30个克隆子进行PCR鉴定和双向测序分析,检测含插入片段的克隆子比例,检测平均插入片段大小

客户提供

注明样品的种属,收集样品后,应将样品立即置于干冰保持低温运输。

我们提供

含有文库的甘油菌和质量分析鉴定报告

质量保证

文库含有至少4x106个原始克隆

样品平均插入片断保证大于1.0kb

有超过85的载体含有插入片段

cDNA文库构建

http://www.ebioeasy.com.cn/ParentList-2186899.html

https://www.chem17.com/st192696/product_35303298.html

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